Maestría en Ciencias Biológicas

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    Aproximaciones multiómicas para el desarrollo de pruebas diagnósticas para Trypanosoma cruzi
    (Universidad CES, 2023-03-02) Barón Vera, Juan Pablo; Sanchez Jiménez, Miryan Margot; Ospina Villa, Juan David; Coinvestigador
    Introducción: La Organización Mundial de la Salud (OMS) indica que aproximadamente el 90% de las personas infectadas por Trypanosoma cruzi (Enfermedad de Chagas) no reciben un diagnóstico oportuno por causas como falta de disponibilidad de las pruebas, variabilidad inter pruebas y grupo del parásito con el que se fabrica la prueba; causando que los pacientes no reciban tratamiento adecuado. Objetivo: Desarrollar prototipos de pruebas diagnósticas para la enfermedad de Chagas basada en proteínas recombinantes de una cepa colombiana de T. cruzi, que permitan un diagnóstico de alta sensibilidad y especificidad. Materiales y métodos: Se realizó un sondeo bioinformático del proteoma de T. cruzi CL Brener en la base de datos KEGG para identificar las proteínas más antigénicas y solubles; se diseñaron cebadores modificados según las necesidades del cromatógrafo, se extrajo DNA de Trypanosoma cruzi cepa Medellín Tc Ia ,se clonaron los genes en el vector pMiniT2.0 usando como hospedero final las células de Escherichia coli BL21; se purificaron las proteínas por medio de cromatografía de afinidad Histaq, se diseñaron pruebas tipo ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) e Inmunoblot y se validaron realizando pruebas a muestras humanas. Se determinaron los valores de Sensibilidad, Especificidad, Valor Predictivo Positivo y Negativo de las pruebas. Resultados: La prueba de Inmunoblot presentó mejor sensibilidad y especificidad que la prueba de ELISA. Conclusión: El Inmunoblot fue la prueba de mejor desempeño, es de fácil realización, no requiere equipo especializado, es de lectura visual y presenta una utilidad potencial para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas en nuestro país.