Evaluación del efecto citotóxico de ApoL1r en células epiteliales renales de Bubalis bubalis, in vitro.
Date
2020-11-17
Authors
Domínguez Guzmán, Lorena
Arteaga Herrera, Ana Sofía
Sánchez Aristizábal, Brian Stanlin
Journal Title
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Publisher
Universidad CES
Abstract
En Colombia, la producción bufalina del país crece cada día y con esto incrementa la
importancia de implementar estrategias de tratamiento y prevención en enfermedades
como la tripanosomiasis que genera grandes pérdidas económicas en dicha producción,
es por esto que la siguiente investigación pretende establecer el efecto citotóxico de la
proteína APOL 1 en podocitos bovinos y su posible utilización en futuras terapéuticas
contra Trypanosoma en búfalos.
La tripanosomiasis en animales domésticos se describe como una enfermedad causada
por parásitos del género Trypanosoma y los tratamientos que se han usado para tratar
la enfermedad como isometamidium y aceturato de diminazene, han empezado a
mostrar resistencias, por lo que es importante encontrar un nuevo tratamiento efectivo
para le enfermedad como el uso de nuevas moléculas químicas y recombinantes, pues representan una nueva alternativa a indagar en el tratamiento de estas infecciones, una
de estas nuevas moléculas es APOL 1.
En el experimento se utilizarán células vivas de morfología epitelial criopreservadas,
estas serán sembradas en un plato de 96 pozos y uno sin administración de proteína
como control negativo, pero bajo las mismas condiciones. Luego de 12 horas serán
tratadas con tetraciclina y su citotoxicidad y viabilidad serán medidas a las 24 horas.
También se medirá la apoptosis. Cada tratamiento será corrido por triplicado y los datos
obtenidos se promediarán para establecer los valores puntuales. No se trabajará con
animales vivos y no se desarrollarán actividades experimentales que pongan en riesgo
a los animales, por lo tanto, se clasifica como riesgo mínimo.
Se espera que en las bajas concentraciones y medianas concentraciones de la proteína
ApoL1, no genere citotoxicidad de las células epiteliales renales, mientras que las altas
concentraciones se espera que produzca alteraciones en la membrana de las células
causando citotoxidad. Aunque esto es lo esperado, y teniendo en cuenta diferentes
estudios, encontraron un aumento de la citotoxicidad en diferentes tipos de células y una
aparente hinchazón celular por la misma citotoxicidad. También se encontró que, aunque
utilizaran inhibidores de la autofagia, no redujeron la citotoxicidad inducida por la
expresión Apol1, esto quiere decir que la muerte celular causada por APOL1 es
independiente de la apoptosis. En otro estudio, se realizó un ensayo alternativo con metiltiazolil-
tratazolio y se encontró que, a las 16 horas, la expresión de la citotoxicidad
aumentó. En conclusión, con respecto a otros estudios, resulto en una pérdida casi
completa de la viabilidad celular. Expresan que uno de los motivos por los que puede
pasar esto, es por las reducidas concentraciones de ATP intracelular, es decir la
reducción de las tasas de respiración mitocondrial, entre otras funciones celulares.
Description
Keywords
APOL 1, Búfalos, Genes, Trypanosoma, Tripanosomiasis, Trypanosoma evansi, Toxicidad