Estandarización de una técnica basada en PCR y RFLP para la detección del polimorfismo +3954 en el gen il-1b
Date
2008
Authors
Duque Duque, Andrés
Salazar, Lina María
Vargas Cifuentes, Sandra Carolina
Correa Uribe, Alejandra
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Univesidad CES
Abstract
Antecedentes: Uno de los polimorfismos más frecuentemente asociados con la
severidad de la enfermedad periodontal es el de la IL-1β en la posición +3954.
Su prevalencia, varía entre diferentes poblaciones y su impacto en cada una
está por determinar.
Objetivo: Estandarizar una técnica basada en PCR (Polimerase Chain
Reaction) y RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism), para detección
del polimorfismo en posición +3954 en el gen para la IL-1β.
Materiales y métodos: Se recolectaron muestras de ADN a partir de enjuagues
e hisopados bucales de 116 pacientes periodontalmente sanos y enfermos. Con
PCR se amplificó un fragmento de 249pb para el gen que codifica para la IL-1β;
y se realizó análisis de restricción (RFLP) para detectar la presencia del
polimorfismo por medio de la enzima TaqI.
Resultados y conclusiones: De 116 muestras tomadas, se obtuvo ADN
íntegro, en concentraciones suficientes en 52, evidenciando que el método de
extracción elegido, afecta la integridad del ADN. El ADN, fue sometido a
reacción de amplificación para obtener el fragmento de 249pb, en todas se
obtuvo el producto de amplificación esperado. En la digestión de los productos
de amplificación, empleando la enzima TaqI; 34 individuos (65%) presentaron un
genotipo negativo; 14 (27%), genotipo positivo- 11 (21%) fueron heterocigotos y
3 (6%) fueron homocigotos-; a 4 (8%) no se les pudo realizar el ensayo de
restricción. Este es capaz de detectar individuos homocigotos y heterocigotos
para ambos alelos. La técnica basada en PCR/RFLP puede emplearse para
evaluar asociación del genotipo positivo para el polimorfismo +3964 en el gen IL-
1B y la severidad de la enfermedad periodontal. Es necesario terminar de
estandarizar la extracción de ADN.
Description
Keywords
Enfermedad periodontal, Odontología, Periodoncia, Periodontitis, Facultad de odontología - especialista - periodoncia