Evaluación de la sobrevivencia de embriones bovinos in vitro criopreservados mediante dos técnicas de preservación.
Date
2011
Authors
Urrego Álvarez, Rodrigo
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Univesidad CES
Abstract
El objetivo principal de este trabajo es la comparación entre dos técnicas de
vitrificación de embriones bovinos in vitro, evaluando la viabilidad y
supervivencia, para lo cual se conformaran dos grupos, cada uno con 20
blastocistos, con una calidad morfológica de excelente a buena de acuerdo a la
clasificación IETS. El primer grupo será criopreservado por el método de
vitrificación convencional utilizando una solución final, compuesta por: 20 % de
glicerol, 20 % de etilenglicol, 0,3 M de sacarosa, 0,3 M de xilosa y 3 % de
polietilenglicol, en la cual permanecerán menos de 1 minuto y posteriormente
serán empacados en pajillas de 0.25 ml. En el segundo grupo, serán
criopreservados por el método de vitrificación en Cryoloop; en una solución
final compuesta por: un medio base, TCM 199 con 20 % de SFB, 35 % de
etilenglicol, 5 % (p/v) de polivinilpirrolidona, sacarosa 0,5M y sulfato de
gentamicina (50 μg/ml), en la cual los embriones se mantendrán entre 25 a 30
segundos a una temperatura de 38 ºC sobre una platina térmica, para después
ser criopreservados y almacenados en los Cryoloops. Para la desvitrificación
de los embriones del grupo uno, la pajilla donde está el embrión será expuesta
al aire por 5 segundos, luego se llevarán al baño María a 20 ºC durante 15
segundos; y para la desvitrificación de los embriones del grupo dos, se
colocarán las microgotas en una placa de Petri durante 1 minuto, y
posteriormente se transferirán a otra placa por 5 minutos. En los dos procesos
se realizará la búsqueda y evaluación del embrión bajo microscopio
estereoscópico.
Description
Keywords
Reproducción in vitro, Medicina veterinaria y zootecnia, Transferencia de embriones, Embriones bovinos