Abstract

ANTECEDENTES: Las metilxantinas son alcaloides estimulantes del sistema nervioso, muscular y circulatorio por lo que dentro de las competencias equinas son comúnmente usadas como sustancias de dopaje, sin embargo en algunas ocasiones su consumo puede hacerse a través de la dieta y generar sanciones que pueden ser objetadas, es por tanto necesario disponer de métodos analíticos que permitan la correcta identificación y cuantificación de metilxantinas en el plasma de caballos para definir si su consumo pudo ser involuntario. OBJETIVO: Desarrollar un método analítico para la determinación de las metilxantinas más comunes en alimentos y medicamentos como son la cafeína, la teofilina y la teobromina, por medio de cromatografía líquida de alta resolución. MÉTODOS: Determinación simultanea de tres metilxantinas cafeína, teofilina y teobromina por cromatografía líquida HPLC con detección UV de arreglo de diodos. La preparación de la muestra se realizó con SPE y luego la separación cromatrográfica se llevó a cabo en una columna C-18 (5μmx 4,6mm x 200mm) usando como fase móvil una mezcla 35:65 de metanol: buffer (ácido cítrico 5mM pH 5). El método se aplicó a muestras de plasma tratadas por triplicado luego de 3 tratamientos: tratamiento 0 consumo de pasto y agua; tratamiento 1 consumo de concentrado comercial que presuntamente contiene metilxantinas; y tratamiento 2 consumo de cafeína (4mg/Kg). RESULTADOS: El método fue evaluado para selectividad, linealidad, repetibilidad, límite de cuantificación y detección, obteniendo resultados que cumplen con las especificaciones. El tiempo de ejecución es corto y con un volumen de inyección de 10 μl es bastante sensible. En el tratamiento 1 se evidenció la presencia de metilxantinas a concentraciones máximas de 0,3210 ±0,016 ppm que relacionado con su metabolismo (tratamiento 2 concentración: 0,2288 ±0,0452 ppm) muestran que se puede tener doping involuntario a través de la dieta, debido a que pueden no estar reportada la presencia de estas sustancias en las etiquetas y para las entidades normativas la presencia de metilxantinas en plasma se considera positivo para dopaje. CONCLUSIONES: El método para la identificación y cuantificación de metilxantinas en plasma equino mostró la presencia de metilxantinas en productos comerciales, por lo cual es posible encontrar dopaje involuntario en las competiciones solo por la presencia de las sustancias, por lo anterior, se hace necesario desde la parte normativa, establecer las concentraciones que causan los efectos estimulantes para cada sustancia a fin de no generar sanciones impugnables.